亚细胞定位服务多重优惠「在线咨询」

研究者首先通过荧光成像技术来定义细胞器和亚细胞区的蛋白质组信息。通过测定30个亚细胞结构的蛋白定位，在细胞图谱中定义了13个亚细胞蛋白质组以及分泌蛋白质的蛋白质组，通过荧光显微镜在细胞图谱中注释的亚细胞结构。使用基于的荧光显微分析技术，替代传统的质谱绘图技术，研究人员使用13993种，定位了细胞间隔和亚结构内的12003种蛋白质，共计完成了13个主要细胞器的蛋白质组学研究。研究人员以蛋白质图谱中的蛋白空间信息对蛋白的互作关系进行验证图5。结果表明，在质膜上的蛋白拥有更多的机会与质膜、高尔基体、囊泡、黏着斑、细胞接头及细胞溶质中的蛋白发生直接的互作关系。

真核细胞有许多独立功能的膜结构组件，蛋白质活性和亚细胞定位的动态调节是许多细胞过程的需要。光具有高空间及时间分辨率，被广泛用于外部触发生物调节。蛋白质可通过融合感光体获得光敏方向性，但这种耗时、复杂的基因编辑过程可能会-正常细胞通路，改变蛋白功能和行为。因此需要更小影响蛋白质功能的策略实现蛋白的准确控制。适配体具有优异的分子识别能力，并且方便修饰，设计灵活。进而促进了人类细胞图谱humancellatlas项目的大胆落实。本文中作者发展了基于适配体的光响应纳米平台，并选择转录因子rela作为实验对象，一种适配体apt可高结合活性、特-识别rela。

原理：构建编码目bai标蛋白和荧光蛋du白的融合蛋白的载体，转染细胞，表zhi达，然后激光共-显微镜dao观察荧光信号所在位置，即可知道该蛋白的亚细胞定位。注意-载荧光蛋白的对照。

具体步骤：构建目标蛋白与gfp的融合蛋白的瞬时表达载体，基因枪轰击洋葱内表皮细胞，或化学peg转化原生质体，瞬时表达后用荧光显微镜观察荧光位置，当然激光共-图片会更漂亮。